タンパク質過酸化物(AOPP)
測定キット
Advaned Oxidation Protein Product Assay Kit |
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| （酸化ストレス研究用試薬） |
| 【AOPPとは】 |
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Advanced oxidation protein products (AOPP)とは 次亜塩素酸（HOCI）が血漿タンパク質に
反応して形成される酸化損傷生成物の総称1）です。AOPPの血清クリアランスの遅れは、AOPPはアテローム性
動脈硬化病変の病理に関わっているとされています2）。AOPPは尿毒症において酸化ストレスのメディエーターで
あることが示されているほか、冠動脈疾患の独立したリスクファクターであることが報告されています。高コレステロール
血症ウサギを対象にした試験では AOPPの静脈投与によってアテローム性動脈硬化病変が促進されることが確認されております
3）。末期腎疾患（ESRD）患者や、透析患者、強直性脊椎炎（AS）患者、糖尿病ラット（GKラット）などで高値を示します。
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| 【AOPPの特徴】 |
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AOPP測定値は脂質酸化マーカーとは異なる挙動を示します。例えばAOPP測定値は血漿中の
ジチロシン濃度やAGEペントシジンと相関する一方、TBARS（脂質酸化物）には相関しないとされています。ラット腎疾患
モデルでは、血漿MDAは上昇しない一方、AOPPは上昇します4）。また、子癇患者ではMDAが上昇するのに対しAOPPは
上昇しないことが知られています。脂質系の酸化ストレスマーカーとは異なる挙動を示すタンパク質酸化損傷マーカーとして
期待されています。
健常者を対象にした研究では、低酸素下での激しい運動によってAOPPが上昇すること、白ワイン摂取によりAOPPが低下することが
報告されています 5）。
また、菜食主義者90名と通常食者46名を対象とした研究では、AOPPがメタボリックシンドロームの
独立したリスクファクターであることが示唆されております6）。
また、最近になり尿中でもAOPPを測定可能であることが報告されており、大腸がんおよび乳がん患者において
高値を示します7)。
本キットはEDTA血漿および尿サンプルを対象に、AOPPを簡便迅速に測定するものです。96穴マイクロプレートを使って比色法
（340nm）にて測定します。
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| 品名 |
商品コード |
測定レンジ |
測定波長 |
価格（税込） |
| AOPP測定キット |
KAP-100D |
6.25～100μmol/L |
340nm |
176,000円 |
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| 【ご注意】本製品は研究用試薬です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。 |
| 【AOPP測定キット 構成品】 |
| マイクロプレート： |
96穴（8*12分割タイプ）1枚 |
そのまま使用します。 |
| アッセイバッファー： |
1本（約65mL） |
そのまま使用します。 |
| 標準物質： |
4本（凍結乾燥品） |
蒸留水1mLを加えて溶解します。濃度はラベルに記載。 |
| コントロール： |
2本（凍結乾燥品） |
蒸留水1mLを加えて溶解します。溶解後は-20℃以下で2ヶ月間使用できます。 |
| 脱脂処理試薬： |
1本（約2.5ml） |
そのまま使用します。 |
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| 【測定プロトコル】 |
| スタンダードの調製： |
1) |
蒸留水を添加して溶解します。
溶解方法、溶解後の濃度は、キット同梱のデータシートに記載されています。
アッセイバッファーを用いて、S1（0µmol/L）～S6（100µmol/L）を調製します。
溶解後のスタンダードは不安定であり、保存できません。 |
| コントロールの調製： |
1) |
蒸留水を添加して溶解します。
液量、溶解後の濃度は、キットに同梱されているデータシートに記載されています。
溶解後のコントロールは不安定であり、保存できません。 |
| サンプルの調製： |
1) |
サンプルには新鮮なEDTA血漿を使用します。
測定前に10,000rpmにて30秒遠心をして不溶物を取り除きます。 |
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2) |
EDTA血漿 125μLに対し、脱脂処理試薬 25μLを加え、ボルテックスでよく攪拌します。 |
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3) |
室温にて10分間インキュベートし、10,000rpmにて5分間遠心します。 |
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4) |
脱脂処理した血漿サンプル 100μLに対し、アッセイバッファー 400μLを添加し、ボルテックスにて
よく攪拌します。 （以上の前処理によりサンプルは6倍希釈されます） |
| 測定手順： |
1) |
予め全ての試薬を室温に戻しておき、サンプルおよびスタンダードを調製します。 |
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2) |
ウェルにStandard-0～5、コントロールおよびサンプルを200μL分注します。 |
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3) |
マイクロプレートリーダーを使って340nmの吸光度を測定します。 |
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4) |
検量線とサンプルの吸光度からAOPP濃度を計算し、6を掛けます（希釈率補正）。 |
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| 【使用上のご注意】 |
| 1) |
使用前にキットを室温（18～26℃）に出し、よく攪拌してください。 |
| 2) |
スタンダードを含め、全ての測定は２重測定（N=2）にて実施してください。 |
| 3) |
信頼性の高いデータを得るために、コントロールは毎回測定されることをお奨めします。 |
| 4) |
異なる試薬ロットの組合せや混合はお避けください。 |
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| 【ご注意】本製品は研究用試薬です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。 |
| 【製品仕様】 |
| ● 測定項目： |
蛋白質過酸化物（AOPP） |
| ● 測定レンジ： |
6.25～100 μmol/L |
| ● 所要時間： |
約15分 |
| ● サンプル所要量： |
125μL（EDTA血漿または尿） |
| ● テスト数： |
41テスト（N=2測定時） |
| ● 必要な器具： |
マイクロプレートリーダー（測定波長340nm）、遠心機（3000 G）、8チャンネルマイクロピペット
（50～250μL）、
マイクロピペット（10～1000μL用）、プラスチック試験管、蒸留水など |
| ● 保存条件： |
2～8℃ |
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| 【参考文献】 |
| 1) |
Witko-Sarsat V, et. Al.: Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress
in uremia. Kidney Int., 49(5):1304-13.(1996) |
| 2) |
Peng KF, et. Al.: Advanced oxidation protein products induce monocyte chemoattractant
protein-1 expression via p38 mitogen-activated protein kinase activation in rat vascular smooth muscle cells. Chin Med J (Engl).
119(13):1088-93 (2006) |
| 3) |
Liu SX, et. Al.: Advanced oxidation protein products accelerate atherosclerosis through promoting
oxidative stress and inflammation. Arterioscler Thromb Vasc Biol.26(5), p1156-1162 (2006) |
| 4) |
Gallardo JM, et. Al.: Inflammation and oxidative stress markers by pentoxifylline treatment
in rats with chronic renal failure and high sodium intake. Arch Med Res. 38(1),p34-8.(2007) |
| 5) |
Rajdl D, et.al.: Effect of white wine consumption on oxidative stress markers and homocysteine levels.
Physiol Res. 2006 Mar 23 |
| 6) |
Sebekova K, et. Al.: Association of metabolic syndrome risk factors with selected markers of
oxidative status and microinflammation in healthy omnivores and vegetarians. Mol Nutr Food Res.50(9),p858-868(2006) |
| 7) |
S. Chandramathi, K. Suresh, Z. B. Anita and U. R. Kuppusamy: Comparative assessment of
urinary oxidative indices in breast and colorectal cancer patients
J Cancer Res Clin Oncol 135(2) p319-323 (2009) |
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| 【ご注意】本製品は研究用試薬です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。 |
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