ホーム > 製品情報 タンパク質酸化損傷マーカー > タンパク質過酸化物(AOPP)測定キット [印刷用] Rev.171107
酸化ストレスマーカー(タンパク質酸化損傷) oxidative stress
タンパク質過酸化物(AOPP) 測定キット advaned oxidation protein product (AOPP) assay kit タンパク質過酸化物(AOPP) 測定キット advaned oxidation protein product (AOPP) assay kit
(本製品は研究用試薬です)
【AOPPとは】
Advanced oxidation protein products (AOPP)とは 次亜塩素酸(HOCI)が血漿タンパク質に 反応して形成される酸化損傷生成物の総称1)です。AOPPの血清クリアランスの遅れは、AOPPはアテローム性 動脈硬化病変の病理に関わっているとされています2)。AOPPは尿毒症において酸化ストレスのメディエーターで あることが示されているほか、冠動脈疾患の独立したリスクファクターであることが報告されています。高コレステロール 血症ウサギを対象にした試験では AOPPの静脈投与によってアテローム性動脈硬化病変が促進されることが確認されております 3)。末期腎疾患(ESRD)患者や、透析患者、強直性脊椎炎(AS)患者、糖尿病ラット(GKラット)などで高値を示します。
【AOPPの特徴】
AOPP測定値は脂質酸化マーカーとは異なる挙動を示します。例えばAOPP測定値は血漿中の ジチロシン濃度やAGEペントシジンと相関する一方、TBARS(脂質酸化物)には相関しないとされています。ラット腎疾患 モデルでは、血漿MDAは上昇しない一方、AOPPは上昇します4)。また、子癇患者ではMDAが上昇するのに対しAOPPは 上昇しないことが知られています。脂質系の酸化ストレスマーカーとは異なる挙動を示すタンパク質酸化損傷マーカーとして 期待されています。
健常者を対象にした研究では、低酸素下での激しい運動によってAOPPが上昇すること、白ワイン摂取によりAOPPが低下することが 報告されています 5)。 また、菜食主義者90名と通常食者46名を対象とした研究では、AOPPがメタボリックシンドロームの 独立したリスクファクターであることが示唆されております6)。 また、最近になり尿中でもAOPPを測定可能であることが報告されており、大腸がんおよび乳がん患者において 高値を示します7)

本キットはEDTA血漿および尿サンプルを対象に、AOPPを簡便迅速に測定するものです。96穴マイクロプレートを使って比色法 (340nm)にて測定します。
【製品仕様】
測定項目: 蛋白質過酸化物(AOPP)
測定レンジ: 6.25〜100 μmol/L
所要時間: 約15分
サンプル所要量: 125μL(EDTA血漿または尿)
テスト数: 41テスト(N=2測定時)
必要な器具: マイクロプレートリーダー(測定波長340nm)、遠心機(3000 G)、8チャンネルマイクロピペット (50〜250μL)、
マイクロピペット(10〜1000μL用)、プラスチック試験管、蒸留水など
保存条件: 2〜8℃
【AOPP測定キット 構成品】
マイクロプレート: 96穴(8*12分割タイプ)1枚 そのまま使用します。
アッセイバッファー: 1本(約65mL) そのまま使用します。
標準物質: 4本(凍結乾燥品) データシートに従い溶解します。濃度はラベルに記載。
コントロール: 2本(凍結乾燥品) データシートに従い溶解します。
脱脂処理試薬: 1本(約2.5ml) そのまま使用します。
※操作方法等は予告なく改訂される場合があります。ご使用前に商品同梱の使用説明書を必ずご確認ください。
【測定プロトコル】
スタンダードの調製: 1) 蒸留水を添加して溶解します。
溶解方法、溶解後の濃度は、キット同梱のデータシートに記載されています。
アッセイバッファーを用いて、S1(0µmol/L)〜S6(100µmol/L)を調製します。
溶解後のスタンダードは不安定であり、保存できません。
コントロールの調製: 1) 蒸留水を添加して溶解します。
液量、溶解後の濃度は、キットに同梱されているデータシートに記載されています。
溶解後のコントロールは不安定であり、保存できません。
サンプルの調製: 1) サンプルには新鮮なEDTA血漿を使用します。
測定前に10,000rpmにて30秒遠心をして不溶物を取り除きます。
  2) EDTA血漿 125μLに対し、脱脂処理試薬 25μLを加え、ボルテックスでよく攪拌します。
  3) 室温にて10分間インキュベートし、10,000rpmにて5分間遠心します。
  4) 脱脂処理した血漿サンプル 100μLに対し、アッセイバッファー 400μLを添加し、ボルテックスにて
よく攪拌します。 (以上の前処理によりサンプルは6倍希釈されます)
測定手順: 1) 予め全ての試薬を室温に戻しておき、サンプルおよびスタンダードを調製します。
  2) ウェルにStandard-0〜5、コントロールおよびサンプルを200μL分注します。
  3) マイクロプレートリーダーを使って340nmの吸光度を測定します。
  4) 検量線とサンプルの吸光度からAOPP濃度を計算し、6を掛けます(希釈率補正)。
【使用上のご注意】
1) 使用前にキットを室温(18〜26℃)に出し、よく攪拌してください。
2) スタンダードを含め、全ての測定は2重測定(N=2)にて実施してください。
3) 信頼性の高いデータを得るために、コントロールは毎回測定されることをお奨めします。
4) 異なる試薬ロットの組合せや混合はお避けください。
【参考文献】
1) Witko-Sarsat V, et. Al.: Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress in uremia. Kidney Int., 49(5):1304-13.(1996)
2) Peng KF, et. Al.: Advanced oxidation protein products induce monocyte chemoattractant protein-1 expression via p38 mitogen-activated protein kinase activation in rat vascular smooth muscle cells. Chin Med J (Engl). 119(13):1088-93 (2006)
3) Liu SX, et. Al.: Advanced oxidation protein products accelerate atherosclerosis through promoting oxidative stress and inflammation. Arterioscler Thromb Vasc Biol.26(5), p1156-1162 (2006)
4) Gallardo JM, et. Al.: Inflammation and oxidative stress markers by pentoxifylline treatment in rats with chronic renal failure and high sodium intake. Arch Med Res. 38(1),p34-8.(2007)
5) Rajdl D, et.al.: Effect of white wine consumption on oxidative stress markers and homocysteine levels. Physiol Res. 2006 Mar 23
6) Sebekova K, et. Al.: Association of metabolic syndrome risk factors with selected markers of oxidative status and microinflammation in healthy omnivores and vegetarians. Mol Nutr Food Res.50(9),p858-868(2006)
7) S. Chandramathi, K. Suresh, Z. B. Anita and U. R. Kuppusamy: Comparative assessment of urinary oxidative indices in breast and colorectal cancer patients J Cancer Res Clin Oncol 135(2) p319-323 (2009)
品名 商品コード 測定レンジ 測定波長 価格
AOPP測定キット KAP-100D 6.25〜100μmol/L 340nm 95,000円(税別)

【製造元】:Immundiagnostik AG (Germany)

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