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| （本製品は研究用試薬です） |
| 【代表的な脂質過酸化マーカー】 |
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マロンジアルデヒド(MDA)は脂質過酸化分解生成物の一つであり、脂質過酸化の主要なマーカーとして広く用いられています。
多価不飽和脂肪酸(PUFA)は活性酸素種/フリーラジカルによる酸化を受けやすく、例えばヒドロキシラジカル
（HO・）と容易に反応して脂質ペルオキシラジカル（LOO・）を形成します。この脂質ペルオキシラジカル（LOO・）は、さらに
別の多価不飽和脂肪酸（PUFA）と反応して脂質ヒドロペルオキシド（LOOH）と脂質ペルオキシラジカル（LOO・）を形成します。
また、脂質ペルオキシラジカル（LOO・）は分子内2重結合に反応して環状エンドペルオキシドを形成し、これがさらに分解されて
マロンジアルデヒド（malondialdehyde: MDA）が形成されます。
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| 【測定原理】 |
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本キットはサンプル中のマロンジアルデヒドをチオバルビツール酸（TBA）と反応させることで
MDA-TBA2付加体を形成させます。この付加体は532nmの波長付近に強い吸収を持つことから、分光学的にMDAを検出します。
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バッファーや培養上清などのサンプルでは、532nmの吸光度を測定することでMDAを簡単に検出できます
（左図 青線）。一方、尿、血漿、組織ホモジネートといったサンプルでは、バックグラウンドの吸収が高くなるケースがあります
（緑および赤線）。このようなケースでは、分光光度計により400～700nmの吸光スペクトル（分解能1nm）を測定し、
3rd delivative analysis（3次微分解析）を行うことで、MDA-TBA2付加体のシグナルを正確に検出できます。
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| 【製品仕様】 |
| 測定対象： |
マロンジアルデヒド |
| 測定原理： |
TBA反応生成物を用いた分光分析 |
| 測定レンジ： |
0.08～10μmol/L |
| 所要時間： |
約1.5時間 |
| サンプル所要量： |
250μL |
| テスト数： |
200テスト |
| 必要な器具： |
マイクロプレートリーダー（測定波長532nm）または分光光度計（400～700nm）※、
ヒートブロック又はウォーターバス（60℃）、マイクロピペット（10μLおよび250μL用）、エッペンチューブ用遠心機
※サンプルの種類により単波長測定か、スペクトル測光かを選択します。 |
| 保存条件： |
冷蔵（2～8℃） |
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| 【キットの構成】 |
| 1）TBA試薬： |
2-thioberbituric acid （5本） |
蒸留水10.5mLを加え、よく攪拌して溶解します。 |
| 2）BHT試薬： |
Buthylated hydroxytoluene溶液（2.5mL） |
そのまま使用します。 |
| 3）酸試薬 |
1M リン酸溶液（10mL*5本） |
そのまま使用します。 |
| 4）アッセイバッファー： |
EDTA含有 リン酸バッファー pH7.0（125mL） |
そのまま使用します。 |
| 5）キャリブレーター： |
Tetramethoxypropane溶液（0/1/2/3/4μM MDA当量） |
そのまま使用します。 |
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| ※操作方法等は予告なく改訂される場合があります。ご使用前に商品同梱の使用説明書を必ずご確認ください。 |
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| 【測定手順】 |
| Step 1） |
エッペンチューブにBHT試薬を10μL分注します。 |
| Step 2） |
キャリブレーターまたはサンプルを250μL添加します。 |
| Step 3） |
酸試薬を250μL添加します。 |
| Step 4） |
TBA試薬を250μL添加します。 |
| Step 5） |
ボルテックスでよく攪拌します（約5秒）。 |
| Step 6） |
60℃にて60分間インキュベートします。 |
| Step 7） |
10,000 Gにて2～3分遠心します。 |
| Step 8） |
532nmの吸光度または400～700nmの吸光スペクトル（推奨：1～2nm 間隔）を測定します。 |
| Step 9） |
吸光データから、MDA濃度を算出します。 |
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| 【参考文献】 |
| 1) |
Biomarkers of free radical damage applications in experimental animals and in humans.
Free Radic Biol Med 26(1-2), p202-226 (1999), de Zwart LL, Meerman JH, Commandeur JN, Vermeulen NP. |
| 2) |
Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and related aldehydes.
Free Radic Biol Med 11(1), p81-128 (1991), Esterbauer H, Schaur RJ, Zollner H. |
| 3) |
Malondialdehyde and thiobarbituric acid-reactivity as diagnostic indices of lipid peroxidation and
peroxidative tissue injury. Free Radic Biol Med 9(6), p515-540 (1990), Janero DR. |
| 4) |
Improved analysis of malondialdehyde in human body fluids.
Free Radic Biol Med 20(2), p251-256 (1996), Jentzsch AM, Bachmann H, Furst P, Biesalski HK. |
| 5) |
Reactions of 1-methyl-2-phenylindole with malondialdehyde and 4-hydroxyalkenals.
Analytical applications to a colorimetric assay of lipid peroxidation.
Chem Res Toxicol 11(10), p1176-1183 (1998), Gerard-Monnier D, Erdelmeier I, Regnard K, Moze-Henry N, Yadan JC, Chaudiere J. |
| 6) |
Free and bound malondialdehyde measured as thiobarbituric acid adduct by HPLC in serum and plasma.
Clin Chem 37(8), p1423-1429(1991), Carbonneau MA, Peuchant E, Sess D, Canioni P, Clerc M. |
| 7) |
Determination of malondialdehyde as dithiobarbituric acid adduct in biological samples by HPLC
with fluorescence detection: comparison with ultraviolet-visible spectrophotometry.
Clin Chem 47(9), p1725-1727 (2001), Lykkesfeldt J. |
| 8) |
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| 9) |
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Stephan Korom, Sven Hillinger, Markus Cardell, Wei Zhai, Qiang Tan,Andre Dutly, Boris Leskosek, Walter Weder. |
| 10) |
Superoxide dismutase activity is significantly lower in end-stage osteoarthritic
cartilage than non-osteoarthritic cartilage.
Plos One (2018), https://doi.org/10.1371/journal.pone.0203944
Masato Koike, Hidetoshi Nojiri, Hiroaki Kanazawa, Hiroto Yamaguchi, Kei Miyagawa,Nana Nagura,
Sammy Banno, Yoshiyuki Iwase, Hisashi Kurosawa,Kazuo Kaneko.
（本キットを使用した組織中MDA測定例です） |
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| 品名 |
商品コード |
測定波長 |
価格（税込） |
| MDA測定キット（TBARS法） |
KMD-008W |
532nm又は400～700nm吸光スペクトル |
88,000円 |
| MDA測定用ELISAキット |
KMD-493K |
450nm 血清/血漿MDA検出に最適
※上記TBARSキットとは測定原理が異なります |
－ |
| 尿/血清 MDA受託検査 |
測定原理：TBARS法／検体提出量：1.5mL(最少0.5mL)
動物検体対応可能 |
7,700円 |
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【製造元】：Northwest Life Science Specialities LLC, USA
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※製品の仕様、価格、操作方法等は予告なく変更される場合があります。
特に操作方法につきましては、ご使用前に商品同梱の使用説明書を必ずご確認ください。 |
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| 品名 |
商品コード |
仕様 |
価格（税込） |
| MDA測定用ELISAキット |
KMD-493K |
血清/血漿中のMDA検出に最適 |
－ |
| 抗MDAモノクローナル抗体 |
MMD-030n |
30μg |
44,000円 |
| ヘキサノイルリジン測定キット |
KHL-700 |
多価不飽和脂肪酸の酸化マーカー。
尿、血清、組織に適用可能。 |
66,000円 |
| 尿中イソプラスタン測定ELISAキット |
KIP-050 |
アラキドン酸由来の脂質酸化マーカー。 |
110,000円 |
| ヒト酸化LDL測定キット |
KLD-020D |
ヒト血清を対象に酸化LDLを検出します。 |
176,000円 |
| マウス酸化LDL測定キット |
KLD-067KT |
マウス血清中の酸化LDLを検出。 |
－ |
| ラット酸化LDL測定キット |
KLD-514KT |
ラット血清中の酸化LDLを検出。 |
－ |
| ウサギ酸化LDL測定キット |
KLD-136KT |
ウサギ血清中の酸化LDLを検出。 |
－ |
| モルモット酸化LDL測定キット |
KLD-789K |
モルモット血清中の酸化LDLを検出。 |
－ |
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| 【ご注意】 |
弊社の提供する試薬、受託分析サービス等は全て研究用です。研究以外の用途（臨床検査/診断/医療行為等）には使用できません。 |
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